Bacterias grampositivas

Bacterias grampositivas: características generales

Las bacterias grampositivas retienen el cristal violeta durante la tinción de Gram y se observan de color violeta o púrpura.

Características principales

Pared celular con una capa gruesa de peptidoglucano. Contienen ácidos teicoicos y lipoteicoicos. No poseen membrana externa como las bacterias gramnegativas. Pueden ser cocos o bacilos, según el género. La tinción orienta la identificación, pero no identifica por sí sola la especie.

Staphylococcus aureus

Cocos grampositivos en racimos. Catalasa positiva. Coagulasa positiva, característica clásica para diferenciarlo de la mayoría de los estafilococos coagulasa negativos. Puede producir colonias doradas y hemólisis beta, aunque no siempre. Tolera concentraciones elevadas de sal. Catalasa: Positiva (Diferencia estafilococos de estreptococos y enterococos en el enfoque clásico).

Coagulasa: Positiva (Apoya la identificación de S. aureus). DNasa: Positiva (habitualmente Prueba de apoyo). Agar sal manitol: Puede fermentar manitol (Amarilleamiento del medio).

Látex: para aglutinación (Habitualmente positivo) Detecta factores como proteína A y/o clumping factor, según el kit.

Ojo: ninguna prueba aislada debe sustituir el algoritmo validado por el laboratorio. Los resultados atípicos requieren confirmación.

MSSA: S. aureus sensible a meticilina. MRSA/SARM: resistente a meticilina y a la mayoría de los betalactámicos habituales contra estafilococos.

Mecanismo clásico de MRSA: gen mecA o, en algunas cepas, mecC, asociado a una proteína fijadora de penicilina alterada, PBP2a/PBP2c.

Resistencia a macrólidos: puede involucrar modificación de la diana ribosomal mediante genes erm.

Resistencia a mupirocina: puede asociarse a cambios o adquisición de genes que alteran la isoleucil-ARNt sintetasa.

La resistencia real se determina mediante pruebas validadas e interpretación según CLSI o EUCAST, de acuerdo con el sistema utilizado por tu laboratorio.

Streptococcus

Los estreptococos son cocos grampositivos que suelen disponerse en cadenas o pares. Son catalasa negativos en el algoritmo clásico.

Tipo de hemólisis

La hemólisis es la destrucción de los eritrocitos presentes en el agar sangre. Algunas bacterias producen sustancias, como hemolisinas, que dañan la membrana de los glóbulos rojos. El aspecto depende de cuánto se destruyen y de cómo cambia la hemoglobina alrededor de la colonia.

Beta (β): hemólisis completa, con zona transparente alrededor de la colonia. Alfa (α): hemólisis parcial, con halo verdoso. Gamma (γ): sin hemólisis aparente.

Cómo leerla en el laboratorio

Zona transparente: beta. Halo verde: alfa. Sin cambio visible: gamma o ausencia de hemólisis.

La hemólisis debe evaluarse en el medio y bajo las condiciones establecidas por el procedimiento del laboratorio. No todos los tipos de agar sangre producen idénticos resultados.

Grampositivas: colonias, hemólisis y pruebas

En agar sangre, S. aureus suele formar colonias más grandes y a menudo betahemolíticas; S. pneumoniae puede verse mucoide o umbilicado con hemólisis alfa; el grupo viridans muestra colonias pequeñas con alfa o gamma; y los enterococos suelen ser gammahemolíticos, con colonias grisáceas o crema. Catalasa, coagulasa, hemólisis y tolerancia a la sal se interpretan juntas, no de forma aislada.

Colonias grisáceas, a veces más grandes. Streptococcus pneumoniae Colonias pequeñas, a veces mucoides; pueden hacerse umbilicadas con el tiempo Alfa. Estreptococos viridans Colonias pequeñas, aspecto variable Alfa o gamma. Enterococcus faecalis/faecium Colonias pequeñas a medianas, grisáceas o crema Frecuentemente gamma; variable.

Los patrones de catalasa, coagulasa, hemólisis y tolerancia a la sal ayudan a separar estos grupos, pero deben interpretarse conjuntamente.

Enterococos: Enterococcus faecalis y E. faecium

Morfología: cocos grampositivos, en pares y cadenas cortas. Colonias: pequeñas, redondas, lisas, de color grisáceo o crema. Hemólisis: frecuentemente gamma, aunque algunas cepas pueden presentar alfa o beta.

Pruebas que debes conocer

Catalasa: negativa en el esquema clásico, aunque puede haber una reacción débil. PYR: positiva habitualmente. Bilis-esculina: positiva. Crecimiento en NaCl al 6,5 %: generalmente positivo en las especies clínicas clásicas. La identificación de especie puede requerir un sistema comercial o MALDI-TOF.

Diferencias importantes

Mecanismo importante: los enterococos resistentes a vancomicina (VRE/ERV) pueden portar genes como vanA o vanB, que modifican el extremo del precursor del peptidoglucano y reducen la unión de vancomicina.

Recuerda: ser PYR positivo y crecer en bilis-esculina no basta para diferenciar todos los enterococos de otros microorganismos; hay que combinar las pruebas.